產(chǎn)品描述
XL10-Gold化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞是經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細(xì)胞，特別適合于大分子量DNA的高效轉(zhuǎn)化。具有四環(huán)素和氯霉素抗性，使用Puc19質(zhì)粒測得其轉(zhuǎn)化效率達(dá)108cfu/μg，主要具有如下特點(diǎn)：
① Hte表型可增強(qiáng)較大分子量質(zhì)粒和連接產(chǎn)物的高效轉(zhuǎn)化；
② 具有限制性內(nèi)切酶缺陷性，更利于克隆 DNA 的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒 DNA 的提??；
XL10-Gold Chemically Competent Cell XL10-Gold化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞③ 更適于質(zhì)粒文庫的構(gòu)建；
④ 具有lacIqZΔM15，可用于藍(lán)、白斑篩選。
本品基因型：
TetrΔ(mcrA)183Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac Hte [F′proAB lacIqZΔM15 Tn10 (Tetr) Amy Camr]。
XL10-Gold Chemically Competent Cell XL10-Gold化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
運(yùn)輸與保存方法
干冰運(yùn)輸。
XL10-Gold化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞-80℃保存，pUC19質(zhì)粒-20℃保存。有效期半年。不能保存于液氮！
注意事項(xiàng)
1）感受態(tài)細(xì)胞應(yīng)保存在-80℃，不可反復(fù)凍融和放置時(shí)間過長，以免降低感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率。
2）整個(gè)轉(zhuǎn)化操作，嚴(yán)格根據(jù)相應(yīng)溫度及無菌條件要求進(jìn)行。
3）為確保*高轉(zhuǎn)化效率，整個(gè)操作過程應(yīng)盡量輕柔，并保持低溫，且每次轉(zhuǎn)化感受態(tài)使用量，不低于100μl。
4）為防止轉(zhuǎn)化不成功，可以保留部分連接反應(yīng)液，以重新轉(zhuǎn)化，*低化實(shí)驗(yàn)可能遇到的風(fēng)險(xiǎn)。
使用方法XL10-Gold Chemically Competent Cell XL10-Gold化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
1）取100 μl感受態(tài)細(xì)胞置于冰浴中融化。
2）向100μl感受態(tài)細(xì)胞懸液中加入0.1-50ng（＜10μl /100μl感受態(tài)）目的DNA或2μl連接產(chǎn)物，輕輕旋轉(zhuǎn)離心管以混勻內(nèi)容物，在冰浴中靜置30min。
3）置于42℃水浴中熱激30s，然后快速將管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冷卻2-3min，該過程不要搖動離心管，否則會降低轉(zhuǎn)化效率。
4）向離心管中加入900μl 42℃預(yù)熱的無菌NZY+培養(yǎng)基（不含***），混勻后置于37℃搖床振蕩培養(yǎng)1h（225-250rpm），目的是促使菌體復(fù)蘇。
【注】：此步也可用LB培養(yǎng)基（不含***）進(jìn)行菌體復(fù)蘇。
5）取上述≤200μl轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂至含有相應(yīng)***的LB固體平板上，將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。
【注】：如需做藍(lán)白斑篩選，需至少孵育17h，以充分顯色。XL10-Gold Chemically Competent Cell XL10-Gold化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞1501 檸檬酸鋰 四水合物, 99.99% metals basis L113839 美國Amresco C6H8O7·3Li 大量 g/mg 美國/中國 上海滬震 常溫，避光 12個(gè)月
1502 美國Amresco 大量 g/mg 美國/中國 上海滬震 常溫，避光 12個(gè)月
1503 美國Amresco 大量 g/mg 美國/中國 上海滬震 常溫，避光 12個(gè)月
1504 L-來蘇糖, 99% L115557 美國Amresco C5H10O5 大量 g/mg 美國/中國 上海滬震 常溫，避光 12個(gè)月
1505 L-(-)-半乳糖, 99% L115558 美國Amresco C6H12O6 大量 g/mg 美國/中國 上海滬震 常溫，避光 12個(gè)月
1506 L-(-)-葡萄糖, 98% L115560 美國Amresco C6H12O6 大量 g/mg 美國/中國 上海滬震 常溫，避光 12個(gè)月
1507 乳酸銀, 90% L120800 美國Amresco C3H5AgO3 大量 g/mg 美國/中國 上海滬震 常溫，避光 12個(gè)月
1508 昆布三糖, 90% L121033 美國Amresco C18H32O16 大量 g/mg 美國/中國 上海滬震 常溫，避光 12個(gè)月
1509 果聚糖, L121035 美國Amresco 大量 g/mg 美國/中國 上海滬震 常溫，避光 12個(gè)月
1510 D-乳糖醇 一水, 99% L121088 美國Amresco C12H24O11 · H2O 大量 g/mg 美國/中國 上海滬震 常溫，避光 12個(gè)月
1511 毛花苷C, 95% L121090 美國Amresco C49H76O20 大量 g/mg 美國/中國 上海滬震 常溫，避光 12個(gè)月
1512 Lys-Tyr-Lys acetate salt, ≥97% (HPLC) L121355 美國Amresco C21H35N5O5·xC2H4O2 大量 g/mg 美國/中國 上海滬震 常溫，避光 12個(gè)月
