RNApure超純總RNA快速提取試劑盒(含DNase I)產(chǎn)品介紹
改進(jìn)的異硫氰酸胍/酚一步法裂解細(xì)胞和滅活RNA酶,然后總RNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜,再通過(guò)一系列快速的漂洗-離心的步驟,去蛋白液和漂洗液將細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除,*后低鹽的RNase free water將純凈RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。
產(chǎn)品特點(diǎn)
1. 離心吸附柱內(nèi)硅基質(zhì)膜全部采用進(jìn)口世界有名公司特制吸附膜,柱與柱之間吸附量差異極小,可重復(fù)性好??朔藝?guó)產(chǎn)試劑盒膜質(zhì)量不穩(wěn)
定的弊端。
2. 結(jié)合了異硫氰酸胍/酚一步法試劑穩(wěn)定性好,純度高和離心柱方便快捷的優(yōu)點(diǎn),RNA可以直接從離心柱上洗脫避免了過(guò)度干燥不易溶解問(wèn)題。
3. 獨(dú)有的RL裂解液配方,可以有效的消除基因組污染。
4. 有效的去除了5S在總RNA中含量,提高了純度。
RNApure超純總RNA快速提取試劑盒(含DNase I)產(chǎn)品儲(chǔ)存
本產(chǎn)品收到后按照上面指示溫度存放各成份,儲(chǔ)存12個(gè)月不影響使用效果。
注意事項(xiàng)
1. **次使用前請(qǐng)先在漂洗液RW瓶和70%乙醇瓶中加入指定量乙醇,加入后請(qǐng)及時(shí)打鉤標(biāo)記已加入乙醇,以免多次加入。
2. 為防止RNA降解,所有離心步驟如未加說(shuō)明,均在4℃低溫進(jìn)行。使用轉(zhuǎn)速可以達(dá)到13,000 rpm的傳統(tǒng)臺(tái)式離心機(jī),如Eppendorf 5415C
或者類似離心機(jī)。
3. 裂解液RL和去蛋白液RE中含有刺激性有害化合物,RNApure超純總RNA快速提取試劑盒(含DNase I)操作時(shí)要戴乳膠手套,避免沾染皮膚、眼睛和衣服。若沾染皮膚、眼睛時(shí),要用大量
清水或者生理鹽水沖洗。
4. 考慮到環(huán)保問(wèn)題,本試劑盒不含有實(shí)驗(yàn)室常用試劑氯仿,用戶使用前需要自備氯仿。
5. 常規(guī)的瓊脂糖凝膠電泳和變性膠電泳均可以用來(lái)分析RNA的質(zhì)量。好的RNA產(chǎn)物在電泳后應(yīng)該可以看到明顯的二條優(yōu)勢(shì)核糖體RNA帶,分別
為~5Kb(28S),~2Kb(18S)條帶亮度比值約為2:1。有時(shí)候也可以看到~0.1kb和0.3Kb(5S,tRNA)帶。時(shí)候根據(jù)不同的物種如某些植物
組織可以看到4,5條帶也屬于正?,F(xiàn)象,如果RNA未成熟的前體或者不均一核RNA、小核RNA提取出來(lái)也可能看到介于7Kb和15Kb之間的不
連續(xù)的高分子量條帶。
6. RNApure超純總RNA快速提取試劑盒(含DNase I)檢測(cè)OD260/OD280吸光度比值時(shí),RNA樣品應(yīng)該溶于TE后檢測(cè),如果用水稀釋后檢測(cè),由于一般水離子強(qiáng)度和PH值低,會(huì)使OD280升高,從
而使比值降低。
7. 加入裂解液RL勻漿后,加氯仿前,樣品可在–70℃至-80℃ 保存一個(gè)月以上。
RNApure超純總RNA快速提取試劑盒(含DNase I)實(shí)驗(yàn)圖例
(具體操作詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū))