ELISA試劑盒可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體
ELISA試劑盒可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體.
在這種測(cè)定方法中有三個(gè)必要的試劑1)固相的**素原或抗體,即"**吸附劑"(immunosorbent);(2)酶符號(hào)的抗原或抗體,稱為"結(jié)合物"(conjugate);(3)酶反應(yīng)的底物.根據(jù)試劑的來歷和標(biāo)本的情況以及檢測(cè)的具體條件,可規(guī)劃出各種不類型的檢測(cè)方法.
ELISA試劑盒可分類是根據(jù)抗原抗體的結(jié)合情況來分類的。
主要有以下幾種類型:(直接法也稱一步法) 1 雙抗體夾心法測(cè)抗原 雙抗體夾心法是檢測(cè)抗原*常用的方法,操作過程如下:
1. 將特異性抗體與固相載體聯(lián)合,構(gòu)成固相抗體.洗刷除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì).
2. 加受檢標(biāo)本,保溫反應(yīng).標(biāo)本中的抗原與固相抗體結(jié)合,構(gòu)成固相抗原抗體復(fù)合物.洗刷除去其他未結(jié)合物質(zhì).
3. ELISA試劑盒加酶標(biāo)抗體,保溫反應(yīng).固相**復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合.完全洗刷未結(jié)合的酶標(biāo)抗體.此時(shí)固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢抗原的量相關(guān).
4. 加底物顯色.固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)品.通過比色,測(cè)知標(biāo)本中抗原的量.在臨床查驗(yàn)中,此法適用于查驗(yàn)各種蛋白質(zhì)等大分子抗原,例如HBsAg,HBeAg,AFP,hCG等.只需獲得針對(duì)受檢抗原的異性抗體,就可用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物而建立此法.如抗體的來歷為抗血清,心的問題.