冷凍保存細胞的凍結與復蘇要點

冷凍保存細胞的凍結與復蘇要點：慢凍快融
（1）凍結操作過程動作要輕。由于冷凍保存過的細胞變得十分軟弱，不只凍結速度要快，而且動作要輕。一般情況

下，凍結后的細胞可直接接種到含徹底成長培育液的細胞培育瓶中直接進行培育（1ml 凍存細胞液加入到 25－30ml 

徹底培育液中），24 小時后再用新鮮徹底培育替換舊培育液，以去除 DMSO。假如，細胞對冷凍保護劑特別靈敏，

那么，凍結后的細胞應先經(jīng)過離心去除冷凍保護劑，然后再接種到含徹底成長培育液的培育瓶中。
（2）快速凍結。凍存細胞從液氮中取出后，應立即放入 37℃水浴中，悄悄搖動冷凍管，使其在 1 分鐘內(nèi)悉數(shù)消

融（不要超越 3 分鐘）。

特別留意：
（1）凍結時必須留意**，防止冷凍管爆裂。，要帶手套，用鑷子將細胞冷凍管從液氮中取出，放入 37℃水浴

中。切不行直接用手，避免**。
（2）冷凍管在水浴中凍結時，要將凍存管蓋子擰緊，斷定擰緊后再投入水浴鍋中，留意液面不行超越凍存管蓋面，

不然，易發(fā)作污染。