養(yǎng)293、293T系列細(xì)胞的3點(diǎn)體會(huì)
1、盡量用早期的細(xì)胞,傳代太多狀態(tài)不好,產(chǎn)毒也不好,貼壁困難。
2、塑料的瓶子,Dmem+10%的小牛血清即可,要求并不高,ATCC上有詳細(xì)的培養(yǎng)方法。
3、主要是傳代,胰酶消化點(diǎn)到即止,不能和其它成纖維細(xì)胞一樣。
*近的體會(huì)是:不用胰酶,輕輕吹打使細(xì)胞脫壁,然后將滴管前端插一個(gè)200ul的槍頭,再吹打1min左右(有點(diǎn)費(fèi)力),肉眼看不見大的細(xì)胞團(tuán)即可,此時(shí)顯微鏡下,可見細(xì)胞都分散開來,多數(shù)為單個(gè),*多數(shù)個(gè)細(xì)胞,培養(yǎng)貼壁效果很好。因?yàn)闃岊^柔軟,開口處小且規(guī)則,可以將細(xì)胞比較溫柔地分開。
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